以下是關(guān)于大鼠可溶性瘦素受體(sLR)ELISA試劑盒的實(shí)驗(yàn)使用說(shuō)明綜合指南：

　　BS-3471 大鼠可溶性瘦素受體(sLR)ELISA試劑盒

　　一、實(shí)驗(yàn)原理

　　采用雙抗體夾心法：用純化的大鼠sLR抗體包被微孔板形成固相抗體，依次加入樣本、HRP標(biāo)記的抗體，形成復(fù)合物后通過(guò)TMB顯色，顏色深度與樣本中sLR濃度正相關(guān)。

　　二、試劑盒組成

　　預(yù)包被微孔板?：含固相抗體

　　標(biāo)準(zhǔn)品?：濃度梯度通常為80、40、20、10、5、2.5 U/L

　　檢測(cè)抗體?：HRP標(biāo)記的sLR抗體

　　顯色底物?：TMB溶液

　　終止液?：酸性溶液(如2M H?SO?)

　　洗滌緩沖液?：PBS或TBS配方

　　三、樣本處理要求

　　樣本類型?：血清、血漿(肝素/EDTA抗凝)、組織勻漿液

　　采集注意事項(xiàng)?：

　　避免溶血，室溫血液凝固10-20分鐘后離心(2000-3000 rpm，20分鐘)

　　長(zhǎng)期保存需-20°C分裝，避免反復(fù)凍融

　　稀釋建議?：通常按1:5~1:20稀釋，高濃度樣本需進(jìn)一步稀釋

　　四、實(shí)驗(yàn)步驟

　　加樣?：

　　每孔加入50μL標(biāo)準(zhǔn)品或樣本，設(shè)雙復(fù)孔

　　孵育?：37°C溫育1小時(shí)，洗滌3次

　　酶標(biāo)抗體結(jié)合?：加入HRP標(biāo)記抗體，37°C孵育30分鐘

　　顯色?：加入TMB底物避光反應(yīng)15分鐘

　　終止與檢測(cè)?：加終止液后15分鐘內(nèi)測(cè)450nm OD值

　　五、注意事項(xiàng)

　　質(zhì)量控制?：

　　每板需設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)曲線孔和質(zhì)控樣本

　　標(biāo)準(zhǔn)曲線R2應(yīng)≥0.99

　　操作規(guī)范?：

　　避免底物接觸金屬器械，終止液有腐蝕性需防護(hù)

　　開(kāi)封后未用完板條需密封干燥保存

　　數(shù)據(jù)計(jì)算?：

　　以標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)繪制曲線，用四參數(shù)擬合計(jì)算樣本濃度

　　六、技術(shù)參數(shù)

　　檢測(cè)范圍?：通常2.5-80 U/L

　　靈敏度?：<1.0 U/L(不同品牌可能有差異)

　　批內(nèi)/批間差?：CV<10%

　　如需具體品牌(如天津本生、天正信達(dá)生物等)的差異說(shuō)明，可進(jìn)一步提供補(bǔ)充信息。

　　天津本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命，追求企業(yè)競(jìng)爭(zhēng)力的不斷提升。公司在經(jīng)營(yíng)中始終秉承：遵紀(jì)守法，嚴(yán)于律己，寬仁以待，敢于承擔(dān)的企業(yè)精神作為標(biāo)準(zhǔn)，以過(guò)硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來(lái)維護(hù)和拓展市場(chǎng)，較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏，是我們的發(fā)展目標(biāo)。本生!您信任的合作伙伴。我們?cè)概c您真誠(chéng)合作，共創(chuàng)美好的未來(lái)。